總糖包括還原糖和非還原糖，還原糖是活性糖類物質(zhì)，可以通過直接化學(xué)滴定法進(jìn)行定量檢測(cè)，如葡萄糖、麥芽糖等。非還原糖是無(wú)活性的糖類物質(zhì)，可以通過水解等方式生成還原糖，如蔗糖、淀粉等。因此，總糖的測(cè)定一般通過水解的方式將食品中的糖類物質(zhì)完全水解成為還原糖后進(jìn)行定量檢測(cè)。總糖與還原糖檢測(cè)方法主要有滴定法、分光光度法、高效液相色譜法、氣相色譜法、旋光法、酶標(biāo)儀法等。
滴定法是總糖與還原糖較為常用的測(cè)定方法之一，主要有直接滴定法、高錳酸鉀滴定法、鐵氰化鉀滴定法等。其中直接滴定法是其中最為常用的方法，需要試劑用量少，檢測(cè)成本低，操作簡(jiǎn)便;但要嚴(yán)格控制檢測(cè)條件，即控制加熱強(qiáng)度要在2min內(nèi)達(dá)穩(wěn)定沸騰，減少氧氣對(duì)滴定終點(diǎn)判斷的影響等。直接滴定法主要是通過將待測(cè)試樣滴定到已標(biāo)定的臨用時(shí)混合的斐林試劑甲液、乙液或堿性酒石酸銅甲液、乙液中，亞甲基藍(lán)為指示劑，由消耗試液體積數(shù)計(jì)算總糖與還原糖的含量，直接滴定法廣泛應(yīng)用總糖與還原糖的檢測(cè)中。
分光光度法的原理是將糖類物質(zhì)水解成還原糖，通過還原糖與顯色劑反應(yīng)生成可在紫外、可見光范圍內(nèi)有吸收峰的物質(zhì)，通過測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)吸光值與濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，再將試液的吸光值代入曲線方程即可測(cè)定還原糖的含量。常用顯色劑有：3-5-二硝基水楊酸、蒽酮-硫酸等。其操作簡(jiǎn)單易行、結(jié)果準(zhǔn)確度高，重復(fù)性好、檢測(cè)成本低等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于各類樣品中總糖與還原糖的測(cè)定。
高效液相色譜法是根據(jù)不同分子結(jié)構(gòu)和相對(duì)分子質(zhì)量的糖類物質(zhì)與色譜柱填充物的作用力程度的差異，洗脫保留時(shí)間不同而將各糖類物質(zhì)進(jìn)行分離，并通過特定檢測(cè)器分別進(jìn)行定量檢測(cè)，常用的檢測(cè)器有示差折光檢測(cè)器、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器、質(zhì)譜等。高效液相色譜能夠一次分別準(zhǔn)確測(cè)定各糖類物質(zhì)的含量，如葡萄糖、果糖、木糖、麥芽糖、蔗糖、乳糖等糖類物質(zhì)的含量同時(shí)測(cè)定，具有分離效率高、檢測(cè)速度快、靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確可靠等優(yōu)點(diǎn)。高效液相色譜法作為實(shí)驗(yàn)室中高端的大型儀器設(shè)備，為大批量樣品檢測(cè)和多種糖類物質(zhì)的同時(shí)檢測(cè)，結(jié)供便捷高效的方法。
隨著檢測(cè)技術(shù)的成熟，糖類物質(zhì)的檢測(cè)方法得到推廣，使實(shí)驗(yàn)人員運(yùn)用起來(lái)更方便得心應(yīng)手。科米代謝也為您檢測(cè)提供優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。
